Алтай-Герметик

Телефон:
+7(385)258-48-01,+7(385)260-93-04

Официальный сайт: http://altgerm.ru

Е-mail:[email protected]

Факс:

Свежие вакансии:

Общая информация:

График работы:

Можно отправить резюме на почту [email protected] или, учитывая время работы пн-пт 8:00–18:00, лично обратиться в отдел кадров, адрес: Алтайский край Барнаул Красноармейский проспект 108а.

Алтай-Герметик отдел кадров телефон адрес

Контакты Алтай-Герметик

Работа вахтой в Барнаул Алтайский край от прямых работодателей

Отзывы о Алтай-Герметик

Где находится и как добраться

2020: 20 июн — 04 июл

$ 3500.00
* Single Suppl .: $ 180.00

80 Полный

Прокат велосипедов

Хардтейл Giant XTC в хорошем состоянии. С алюминиевой жесткой рамой, передней подвеской, гидравлическими дисковыми тормозами, 27.Эти велосипеды с 5-дюймовыми колесами и 30 передачами идеально подходят для этого тура.
В наших запасных транспортных средствах есть инструменты, хотя для тех, кто компетентен в обслуживании велосипедов, привезти собственный насос, набор для прокола и многофункциональный инструмент ускорит любой ремонт и регулировку на обочине дороги.

Арендная плата: 100 долларов США

* Доплата за одноместный номер

Указанные выше цены указаны для совместного проживания в двухместном номере. Если вы путешествуете один, вы будете в паре с другим одиноким путешественником того же пола. поделитесь с.Возможно размещение в одноместном номере. Стоимость одноместного доплаты указана на человека.

Частота нестабильных хромосомных аберраций в лимфоцитах крови в …

Цель: Анализ результатов цитогенетического исследования и реконструкция доз облучения по частоте хромосомных аберраций у ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС. Материалы и методы: С 1986 года обследовано более 1500 человек, работавших в зоне аварии преимущественно в 1986 и 1987 годах.Все они были исследованы с помощью классического цитогенетического метода, позволяющего оценить уровень нестабильных хромосомных аберраций. 64 пациента (в том числе 12 специалистов Курчатовского института) были обследованы методом FISH, позволяющим оценить уровень симметричных транслокаций. Результаты. Проведенное в 1986 г. цитогенетическое исследование выявило высокий уровень клеток с дицентриками (в 16 раз превышающий контрольный уровень) в группе ликвидаторов.В последующие годы этот уровень значительно снизился. Однако даже через 15 лет после завершения работ в зоне аварии частота ячеек с дицентриками в группе ликвидаторов значительно превышает контрольный уровень. По частоте встречаемости клеток с дицентриками и калибровочной кривой доза-реакция определена доза облучения для группы ликвидаторов, обследованных в 1986 г. Средняя доза облучения составила 0,14 Гр. По частоте транслокаций оценена доза облучения для группы из 52 ликвидаторов.Средняя доза для всей группы составила 0,16 Гр. Для 18 пациентов, у которых частота транслокаций достоверно отличалась от контрольного уровня, определены индивидуальные дозы воздействия. Разброс доз составлял от 0,22 до 1,0 Гр. В 1996 году обследовано 22 сотрудника Курчатовского института. У большинства из них (13 пациентов) частота дицентриков в лимфоцитах периферической крови была достоверно выше контрольных значений. У пяти пациентов были обнаружены клетки с множественными хромосомными аберрациями. Трое обследованных рабочих получили сверхвысокие дозы. Частота дицентриков в лимфоцитах периферической крови этих пациентов была в 100 и даже 1000 раз выше контрольного уровня. Дозы облучения, рассчитанные для пяти сотрудников Курчатовского института по частоте транслокаций с использованием калибровочной кривой, находились в диапазоне от 0,21 до 2,51 Гр. Эти дозы были рассчитаны без поправочных коэффициентов, т.е.без учета того факта, что эти рабочие в течение нескольких лет подвергались многократному облучению с разными мощностями доз.Учет этих условий приведет к увеличению расчетных поглощенных доз. Вывод: цитогенетические методы достаточно чувствительны для оценки состояния наследственных структур клеток. Анализ нестабильных хромосомных аберраций — решающий метод мониторинга больших групп людей, подвергшихся радиационному воздействию в результате ядерных аварий. Данные цитогенетического исследования могут быть одним из критериев при формировании групп с повышенным риском развития различных заболеваний.Одним из наиболее перспективных цитогенетических методов биологической дозиметрии является анализ стабильных транслокаций методом FISH. Нижний предел оценки дозы по частоте транслокаций — 20-25 сГр. 257 1. Введение Уже более нескольких десятилетий анализ хромосомных аберраций в лимфоцитах периферической крови успешно применяется для обследования людей, подвергшихся радиационному воздействию во время различных аварий [1-9]. Результаты цитогенетического анализа служат основой для оценки поглощенных доз облучения и для прогнозирования возможных негативных эффектов облучения.Традиционной процедурой в биодозиметрических исследованиях является анализ частоты хромосомных аберраций, а именно дицентриков или симметричных транслокаций. Радиобиологической основой применения цитогенетических показателей в дозиметрических исследованиях является наличие зависимости между дозой и выходом хромосомных аберраций, а также совпадение кривых доза-эффект при облучении клеток крови in vitro и in vivo. Принято считать (и это подтверждено некоторыми исследованиями) [10,11], что частоты дицентриков и транслокаций сразу после облучения практически совпадают.Клетки с дицентриками являются хорошими индикаторами облучения через короткие промежутки времени после радиационного воздействия. По прошествии времени после воздействия такие клетки удаляются из периферической крови, поскольку их прохождение через митоз затруднено [12]. В связи с этим анализ частоты дицентриков малоэффективен для ретроспективной оценки доз облучения. По прошествии длительного времени после радиационного воздействия, а также в условиях длительного хронического или длительного облучения накопленная доза оценивается с помощью анализа стабильных хромосомных аберраций — симметричных транслокаций.По мнению некоторых авторов [5,6,13-15] частота клеток с транслокациями остается постоянной в течение длительного времени после облучения или, как полагают другие исследователи [16,17], может снижаться, но значительно медленнее. темп по сравнению с клетками с дицентриками. Последнее накладывает определенные ограничения на оценку доз облучения по частоте транслокаций, но важность использования цитогенетических методов в биодозиметрических исследованиях не уменьшается. В аварийных ситуациях, когда надежные методы физической дозиметрии часто отсутствуют, анализ хромосомных аберраций позволяет определить степень радиационного поражения организма с учетом его индивидуальных особенностей и, в первую очередь, индивидуальной радиочувствительности.Информация о «биологической дозе» имеет большое прогностическое значение для оценки отдаленных эффектов облучения и для выбора адекватных методов терапии и профилактики. В случае масштабного цитогенетического мониторинга в группах людей, подвергшихся радиационному воздействию в результате радиационных аварий, особое значение приобретает анализ нестабильных хромосомных аберраций. Он позволяет обследовать достаточно большие контингенты облученных людей без особых финансовых затрат и без применения сложных методик. Результаты такого мониторинга позволяют получить информацию о влиянии радиационных факторов на организм, о степени повреждения генома и, в конечном итоге, могут быть использованы как критерии при формировании групп людей с высоким риском возникновения. различных заболеваний, в том числе онкологических [18,19]. 2. Предметы, материалы и методы 2.1. Истории болезни обследованных пациентов Авария на Чернобыльской АЭС — самая драматическая экологическая катастрофа ХХ века.Одна из самых больших категорий населения, наиболее пострадавшая в результате этой катастрофы, — это ликвидаторы. С 1986 года Российский научный центр рентгено-радиологии и Н.И. В Институте общей генетики им. Вавилова проводятся совместные цитогенетические исследования ликвидаторов [20,21]. К настоящему времени обследовано более 1500 человек. Все обследованные ликвидаторы участвовали в восстановительных работах в 30-километровой зоне в 1986 и 1987 годах.Некоторые ликвидаторы приехали работать в Чернобыль и в последующие годы, вплоть до 1995 года. Общий срок работы в зоне аварии составлял от 2 недель до 13 месяцев. Работы ликвидаторов были очень разнообразными. Среди обследованных пациентов были специалисты в области дозиметрии и дезактивации, научные сотрудники, медики, водители, монтажники, строители «саркофагов», пилоты вертолетов и разнорабочие. Большинство ликвидаторов получили дозы до 1 Гр.

Кох Химия Сибирь | Нанотехнологическая компания

О компании

Chemie GmbH-koch — ведущий немецкий производитель профессиональной автохимии и автомобилей, официально поставляющий свою продукцию в сервисные и торговые центры Daimler AG, BMW AG, Volkswagen AG, Audi Ingolstadt и другие. Компания «Коч Химия Сибирь» является эксклюзивным дистрибьютором Koch Chemie на территории сибирских регионов. На данный момент офис работает в Новосибирской, Кемеровской, Омской и Томской областях, а также в Алтайском крае и

Chemie GmbH-koch — ведущий немецкий производитель профессиональной автохимии и автомобилей, официально поставляющий свою продукцию в сервисные и торговые центры Daimler AG, BMW AG, Volkswagen AG, Audi Ingolstadt и другие. Компания «Коч Химия Сибирь» является эксклюзивным дистрибьютором Koch Chemie на территории сибирских регионов. На данный момент офис работает в Новосибирской, Кемеровской, Омской и Томской областях, а также в Алтайском крае и Республике Хакасия. Наша миссия — повышение уровня обслуживания детейлингового * рынка, внедрение современных технологий ухода за автомобилем. Наши целевые клиенты — автомойки, полировальные и тюнинговые центры, кузовные станции, автосалоны — могут улучшить качество услуг, расширить их ассортимент и стать более конкурентоспособными на рынке.Специалисты компании имеют углубленное обучение на заводе Koch Chemie в Германии и высокий уровень экспертизы, глубокое знание продукта и его потребительских свойств, что подтверждается сертификатами стандарта BFA и BTG. Один из основных критериев оценки профессиональной работы — клиентоориентированность, что означает способность дать исчерпывающую консультацию по любым вопросам, связанным с предоставлением услуг и использованием продукта, готовность быстро решить любую проблему, в том числе в помещении клиента. , стремление вести «совместный» бизнес, напрямую участвуя в продвижении услуг и внедрении технологий на предприятии.

Dayton Daily News из Дейтона, штат Огайо, 9 октября 1988 г. · 238

Page 6 10-M8 — 10-1W8 3 x50 ‘4 MIL ЛИСТ, Super-tougn tjuiy «». Идеально подходит для рисования, садоводства, WinOOWb ai iu ‘- 10×25’ 3,5 MIL (726284401673) 10 X100 4 MIL (4017D1Wil KITCHEN ANDlKftan dhuo 13 галлонов, высокий Китенуэй; -, RJ102 (975869) Мешки для мусора 30 галлонов, 20 кар RJ104 ( 9759MI .Dunfi 19759721 Я не копирую никаких деталей. 12 ‘МНОГОПОЛЬЗОВАТЕЛЬСКАЯ ЛЕСТНИЦА Цена продажи 109,99 Lett tdfc’t LoUIIng.10 YEAR FLAT LATEX Качество премиум-класса Покрывает большинство цветов одним слоем. Высыхает до гладкой, моющейся поверхности. Colony 10 YEAR FLAT LATEX HOUSE PAINT. Доступен во многих цветах декоратора. Быстро сохнет, очищается водой с мылом. Серия 8300 (375580) 10 лестниц в одной! Преобразуется из 12-футовой прямой лестницы в 6-футовую стремянку в строительные леса и т. Д. Сверхпрочный полированный алюминий без ржавчины Складывается для большинства автомобильных багажников i? 1486 88618? urn WW AFTER REBATE 16 ‘LADDER i? i493 (886190) 119,99 Однослойное покрытие высшего качества Легкое смывание водой и мылом Устойчивость к образованию пузырей и выцветанию Гарантия 10 лет Подробности см. в магазине Доступны многие цвета 8soo Series 5 YEAR FLAT LATEX HOUSE PAINT 9500 сен 39.99 с мхо ‘5 гал. Обеспечивает водонепроницаемость дерева, бетона, кирпичной кладки и т. Д. Устанавливает барьер под поверхностью, позволяя материалу дышать, но предотвращая проникновение влаги. Высыхает до прозрачного матового покрытия под покраску imo5N (411371) Ежедневно дешево Цена меньше Наша почтовая скидка DAP a ПРОЗРАЧНЫЙ СИЛИКОНОВЫЙ ГЕРМЕТИК ИЛИ ВАННА Не трескается и не сжимается Ограниченная гарантия 20 лет См. Магазин iui ueiaus neuaie expires h ntm l1231 88 Ограничение 2 86408641 (394732393987) imd 999 Arm mm nun 35 YEAR БЕЛЫЙ АКРИЛОВЫЙ ГЕРМЕТИК Ширина зазоров и уплотнений составляет до 2 дюймов Легко наносится, поддается покраске Гарантировано производителем.на 35 лет — Подробности см. в магазине 14662 (949899) an (0.JM. i 2J Altai 70 00 Mill In Rabale mmy mi DSt J Mm SS I fixture isl JR8! 3f mm mmmml iBPf mm ww I tym С КОМПЛЕКТОМ СВЕТИЛЬНИКА mW AWtatm NH Ao) I. ночное освещение HlTYri if — «w1:,;, ‘Black vSherproof poly I I 1 jX 42″ ПЕРЕМЕННАЯ КРЕПЛЕНИЕ, 4 фута I til i & amp; KKstrim H ISSfj ПОТОЛОЧНЫЙ ВЕНТИЛЯТОР ZmBHMX lFh 9 I — i I 48 » CHANNELIGHT, Jzm; speedr ‘sin9 f Oj сплошная латунная стенка, .r ,, p, 1s ,, u, f Van sP? Выбор античного mmMW I Yi’HJ TM ФОНАРЬ mtktk I ldeal ‘или гараж MJmMS Xsm aras «- W Vmm JIQS9 I lshop iVvsym I 52» ПОТОЛОЧНЫЙ ВЕНТИЛЯТОР С ПЕРЕМЕННОЙ КРЕПЛЕНИЕМ! Vf.I f, L «RflMR’ND JS J J отделка латунь; колба nn9 i

Пуля ломкая для ружья «Алтай-1»

(57) Реферат:

Фармакологическое обоснование возможности использования веполоксамера для лечения острого синдрома грудной клетки у пациентов с серповидноклеточной болезнью

Серповидно-клеточная болезнь (SCD) — аутосомно-рецессивное заболевание, вызванное заменой одной аминокислоты в гемоглобине (Hb) β. цепь, которая заставляет его полимеризоваться в дезокси-состоянии.Острый синдром грудной клетки (ОКС) с гипоксической дыхательной недостаточностью является частой причиной смерти взрослых пациентов с ВСС. Недавние исследования показали, как множественные болезненные процессы, включая несоответствующую клеточную адгезию, гемолиз, дисфункциональную коагуляцию, воспаление, ишемию и повреждение тканей, вовлечены в патофизиологию ОКС. В этой обзорной статье мы обсуждаем, как активность высокоочищенного неионогенного амфифильного триблок-сополимера веполоксамера в восстановлении поврежденных мембран и препятствовании несоответствующим адгезивным взаимодействиям и событиям активации потенциально может быть полезна при ACS в силу его способности влиять на несколько аспекты патофизиологии.

Серповидно-клеточная анемия (SCD) — это аутосомно-рецессивное заболевание, вызванное заменой одной аминокислоты в β-цепи гемоглобина (Hb), которая приводит к его полимеризации в дезокси-состоянии. Полимеризация гемоглобина приводит к образованию эритроцитов (эритроцитов), реологически нарушенных и захваченных микрососудом, что приводит к ишемии тканей [1]. Вазоокклюзионный кризис (ЛОК) является отличительным признаком заболевания и состоит из сильных эпизодических болей в спине, груди, животе и суставах.Частым осложнением ЛОС является легочное заболевание, известное как острый грудной синдром (ОКС), типичным примером которого является новый легочный инфильтрат на рентгенограмме грудной клетки наряду с лейкоцитозом, лихорадкой, кашлем, болью в груди и другими легочными симптомами [2]. В проспективном совместном исследовании серповидно-клеточной анемии частота случаев гомозиготной ВСС составила 12,8 эпизодов ОКС / 100 пациенто-лет [3]. ОКС с гипоксической дыхательной недостаточностью — частая причина смерти взрослых пациентов с ВСС [4].

Происхождение ACS было связано с широким спектром патологических процессов, включая инфекцию, жировую эмболию и инфаркт легочной ткани [5].Независимо от происхождения легочная вазоокклюзия, вероятно, является распространенным патофизиологическим путем к ее клиническим проявлениям [6]. В основе вазоокклюзии лежит полимеризация гемоглобина S (HbS) в условиях гипоксии и обширная эндотелиальная дисфункция с повышенной экспрессией множественных молекул клеточной адгезии, способствующей рекрутированию сосудистых лейкоцитов, воспалению и активации коагуляции с тромбозом [7]. Гемолиз и связанное с ним повышение уровня гемоглобина в бесклеточной плазме еще больше усугубляют эндотелиальную дисфункцию, поскольку биодоступность оксида азота (NO) снижается из-за поглощения NO бесклеточным гемом [8], соединением, которое также активирует врожденный иммунитет после связывания эндотелиального Toll. -подобный рецептор 4 [9].

За заметным исключением полимеризации HbS, веполоксамер, как было показано, влияет на многие патологические процессы, активные при ОКС, либо профилактически, вмешиваясь в события активации, которые управляют патогенезом, либо посредством паллиативных действий против процессов, связанных с прогрессирующей клинической патологией. Примеры включают: ингибирование агрегации эритроцитов, таким образом снижая вязкость цельной крови, стабилизацию мембран эритроцитов, тем самым уменьшая гемолиз и высвобождение свободного гема, и предотвращая адгезивные взаимодействия между клетками крови и активированным эндотелием, тем самым подавляя окклюзию, воспаление, тромбоз и ишемическое повреждение ткани.В этой публикации обобщены результаты исследований влияния веполоксамера на те процессы, которые имеют отношение к патофизиологии ОКС. При этом мы предоставляем информацию о потенциальных механизмах, с помощью которых веполоксамер может быть полезен при лечении ОКС, клинических состояний, для которых в остальном мало терапевтических возможностей.

Веполоксамер представляет собой высокоочищенный неионогенный амфифильный триблок-сополимер полиоксипропилена (ПОП), фланкированный с обеих сторон полиоксиэтиленом (ПОЭ) [10] (см. Рисунок 1).Его основная структура придает поверхностно-активные свойства, которые позволяют модулировать биофизические свойства клеточной мембраны, включая ее стабильность, гидратацию, восстановление, гибкость и адгезионные свойства, которые играют решающую роль в биологических реакциях [11]. Веполоксамер в настоящее время изучается в рамках исследования фазы III, чтобы оценить, может ли он уменьшить продолжительность действия летучих органических соединений (т. Е. Исследование EPIC: Evaluation of Purified Poloxamer 188 In Crisis. Clinical Trials.gov Identifier: NCT01737814). В исследовании также будет оцениваться, может ли веполоксамер снизить частоту повторных госпитализаций после кризиса и частоту ОКС во время ЛОС.

Рисунок 1: Структура веполоксамера.

Веполоксамер представляет собой очищенную форму полоксамера 188. Он состоит из блоков гидрофобного полиоксипропилена (POP) и гидрофильного полиоксиэтилена (POE), расположенных, как показано, с координатами a и b, приблизительно равными 80 и 30 соответственно. Его средняя МВт составляет 8500 Дальтон.

Теоретический механизм действия

Как и все поверхностно-активные вещества, веполоксамер (и его неочищенное исходное соединение полоксамер 188) прилипает к гидрофобным поверхностям в водной среде, вызывая их гидратацию (см. Рисунок 2).Он особенно эффективен для блокирования гидрофобных адгезионных взаимодействий и диспергирования гидрофобных агрегатов. Однако, в отличие от многих поверхностно-активных веществ, он не проникает и не вызывает разрушение мембраны, а вместо этого герметизирует и защищает поврежденные поверхности мембраны [12,13,14]. Профиль активности веполоксамера является следствием его уникального химического состава. Гидрофобный компонент веполоксамера относительно невелик и слаб из-за присутствия атомов кислорода в его цепи POP, и, как следствие, он прилипает к гидрофобным поверхностям, но слишком слаб, чтобы проникать и разрушать интактный липидный бислой.Однако гидрофобная часть POP будет разделяться на неупорядоченную жидкую фазу поврежденных мембран, где ацильные цепи фосфолипидов смещены и подвержены воздействию водной среды. Исследования отражательной способности рентгеновских лучей показывают, что, физически занимая доступную площадь и отделяясь от липидов, веполоксамер усиливает боковую упаковку ацильных цепей фосфолипидов, создавая конденсированную фазу. Это восстанавливает барьерную функцию мембраны, т.е. действует как мембранный герметик [15].Реорганизация липидов, облегчаемая веполоксамером, по-видимому, является механизмом, объясняющим его способность восстанавливать как механические, химические, так и ишемические повреждения широкого диапазона типов клеток [12,16]. Исследования показывают, что при восстановлении мембраны веполоксамер по существу «выдавливается», то есть удаляется из восстановленной мембраны путем латерального сжатия [15,17].

Рисунок 2: Механизм действия веполоксамера.

В водной среде веполоксамер существует в виде очень маленьких мицелл, включая одиночные молекулы, намотанные на себя (вверху). Когда повреждение клеточной мембраны обнажает гидрофобные домены, она мгновенно прикрепляется, восстанавливая неклейкую поверхность, тем самым защищая клетку, подавляя адгезию и способствуя нормальному микроваскулярному кровотоку (внизу). Он высвобождается при ремонте мембраны. Имеющиеся данные свидетельствуют о том, что этот простой механизм лежит в основе всей биологической активности веполоксамера.

Гидрофильные POE-цепи веполоксамера также являются особыми. Они взаимодействуют с окружающей водной средой, образуя гидратированный, плохо сжимаемый барьер.Это может объяснить наблюдаемую антиадгезивную активность веполоксамера, поскольку плохо сжимаемый барьер может не допускать достаточной близости, чтобы позволить высокоспецифичные взаимодействия, опосредованные рецептором-лигандом. Поскольку веполоксамер может прилипать только к поврежденной ткани, он не может препятствовать этому типу специфических взаимодействий рецептор-лиганд в здоровой ткани. Это может объяснить его высокую степень переносимости, которая на сегодняшний день повсеместно наблюдалась для веполоксамера в доклинических и клинических исследованиях.

Ниже приводится обзор активности веполоксамера in vitro , которая может иметь отношение к патофизиологии ACS.

Серповидно-клеточная реология крови

Актуальность измененных реологических свойств крови у субъектов с ВСС оценивается уже более 70 лет [18]. Многие исследователи документально подтвердили, что эритроциты, полученные от пациентов с ВСС, обладают пониженной деформируемостью, повышенной вязкостью и имеют тенденцию к образованию сильно сложных агрегатов [19–23].

Действия веполоксамера и их потенциальное применение при лечении ACS

Ниже приводится обзор активности веполоксамера in vitro , которая может иметь отношение к патофизиологии ACS.

Влияние веполоксамера на деформируемость эритроцитов серпа:

Плохая деформируемость серповидных эритроцитов (sRBC), происходящая из-за внутриклеточной полимеризации HbS, лежит в основе реологических аномалий, наблюдаемых при SCD [24,25]. Все доступные данные предполагают, что веполоксамер не влияет на полимеризацию HbS. Однако экспериментальные данные показывают, что он оказывает существенное влияние на деформируемость sRBC. Используя видеомикроскопию, Хантер [26] продемонстрировал, что sRBC кажутся заметно более деформируемыми при обработке веполоксамером по сравнению с тем же образцом, обработанным физиологическим раствором (рис. 3).

Рисунок 3: Влияние веполоксамера на деформируемость эритроцитов серпа, наблюдаемую под световой микроскопией.

Веполоксамер (1,0 мг / мл) (левая панель) или такой же объем 0,9% физиологического раствора (правая панель) добавляли к антикоагулированной крови, полученной от пациента с SCD во время острого криза. Кровь помещали на предметное стекло микроскопа и исследовали с помощью световой видеомикроскопии. SRBC с добавлением физиологического раствора казались жесткими и не деформируемыми при контакте с прилипшими лейкоцитами, когда поток был вызван легким давлением на покровное стекло.Напротив, sRBC, обработанные веполоксамером, показали заметно повышенную гибкость и деформируемость; при контакте они деформируются и могут перемещаться между узкими каналами, образованными прилипшими лейкоцитами. Фотографии представляют собой кадры видео, снятые с одинаковым увеличением и в одинаковых условиях. Различия в цвете и форме, вероятно, связаны с изменениями формы и деформируемостью, вызываемыми веполоксамером [26].

Исследования фильтруемости sRBC в присутствии физиологического раствора или веполоксамера могут дополнительно подтвердить его влияние на деформируемость.При использовании системы фильтрации гемореометра фильтруемость sRBC через поры длиной 12 мкМ и внутренним диаметром 5 мкМ улучшилась на 20-30% в присутствии веполоксамера в концентрациях от 0,25 до 5,0 мг / мл по сравнению с контролем (рис. 4). В совокупности эти результаты предполагают, что, хотя веполоксамер не изменяет лежащую в основе полимеризацию HbS, он, по-видимому, улучшает деформируемость sRBC и, таким образом, может улучшить кровоток во время ACS, возможно, за счет улучшения или восстановления деформируемости мембраны.

Рис. 4: Влияние веполоксамера на деформируемость эритроцитов серпа, наблюдаемую с помощью системы фильтрации гемореометра.

Деформируемость sRBC, суспендированных в PBS (гематокрит 3%) с различными концентрациями веполоксамера, измеряли с использованием системы фильтрации Hemorheometre. Тест основан на скорости потока sRBC через поры диаметром 5 мкм (длиной 12 мкм) при 37 ° C и градиенте давления воды 6 см [2

Влияние веполоксамера на вязкость цельной крови:

Было показано, что веполоксамер оказывает зависимое от концентрации действие на вязкость цельной крови как у здоровых пациентов, так и у пациентов с внезапной сердечной смертью. При добавлении в кровь, полученную от пациентов с ВСС в стабильном состоянии, веполоксамер в концентрациях от 0,25 мг / мл до 2,0 мг / мл оказывал незначительное влияние на вязкость цельной крови или не оказывал никакого влияния на вязкость цельной крови при более высоких скоростях сдвига, в то время как при более низких условиях сдвига он вызывал 20 -23% снижение вязкости (рис. 5). Эти наблюдения показывают, что веполоксамер может помочь нормализовать повышенную вязкость, которая может возникать при ОКС.

Рис. 5: Веполоксамер снижает вязкость серповидно-клеточной цельной крови.

Веполоксамер добавляли к цельной крови (гематокрит 40%) в концентрациях от 0,25 мг / мл до 2,0 мг / мл. Вязкость измеряли с помощью вискозиметра Contraves при трех скоростях сдвига. Результаты представляют собой среднее значение образцов от 11 пациентов с ВСС по сравнению с контрольными образцами с фосфатным буфером [27].

Влияние на агрегацию / дезагрегацию эритроцитов серпа

Исследования Ex vivo с использованием крови, полученной от пациентов с SCD, продемонстрировали, что веполоксамер оказывает зависимое от концентрации действие на силу индуцированной декстраном агрегации sRBC. В клинически значимых концентрациях (0,5–1,0 мг / мл) веполоксамер снижает как степень агрегации sRBC, так и силу агрегатов RBC (измеряемую силой сдвига, необходимой для разрушения агрегатов) примерно на 30% по сравнению с фосфатным буфером. физиологический раствор (рисунок 6). Другие методы агрегации эритроцитов (скорость оседания эритроцитов и микроскопический индекс агрегации показали аналогичные дозозависимые эффекты для веполоксамера (данные не показаны).Результаты демонстрируют, что веполоксамер вызывает устойчивое, зависящее от концентрации снижение как степени, так и силы агрегации эритроцитов, и предполагают, что веполоксамер может снижать агрегацию эритроцитов во время ОКС.

Рисунок 6: Веполоксамер снижает агрегацию серповидных эритроцитов.

Эффект трех концентраций веполоксамера на декстран-индуцированную агрегацию sRBC определяли с использованием агрегометра Myrenne.Результаты представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение образцов от 11 пациентов с ВСС по сравнению с контрольной группой с фосфатным буфером и физиологическим раствором [27].

Влияние на адгезию клеток

В исследованиях, проведенных на сегодняшний день, было показано, что веполоксамер проявляет сильную активность в ингибировании VCAM-опосредованной адгезии.Hsu с соавторами [37] сравнили эффект веполоксамера с блокирующей способностью антител, специфичных к VCAM, CD-29 и CD49, на индуцированную ЛПС адгезию эритроцитов и лейкоцитов в кремасторной микроциркуляции трансгенных серповидных мышей. У контрольных животных ЛПС приводил к снижению количества перфузируемых капилляров на 27% (что было обратно пропорционально количеству прикрепившихся эритроцитов и лейкоцитов). Предварительная обработка анти-VCAM полностью подавляла побочные эффекты LPS. Лечение веполоксамером дало почти идентичный ингибирующий эффект.Эффекты веполоксамера на VCAM-опосредованную адгезию также изучались с использованием свежесобранной крови пациентов с SCD с использованием микрофлюидного анализа. В этих исследованиях наблюдалось сильное концентрированное связанное снижение адгезии, опосредованной VCAM. В клинически значимых концентрациях (0,1–1,0 мг / мл) веполоксамер вызывал снижение адгезии более чем на 60% по сравнению с отрицательным контролем (рис. 7).

Рисунок 7: Веполоксамер снижает адгезию клеток цельной крови к VCAM-1.

Свежеполученная антикоагулированная цельная кровь, полученная от педиатрических пациентов с серповидноклеточными клетками в стабильном состоянии (n = 15), была дополнена либо веполоксамером, либо физиологическим раствором. Затем кровь циркулировала через микрофлюидные проточные каналы, покрытые VCAM-1, с физиологической скоростью потока. Адгезию измеряли путем подсчета количества прикрепленных клеток на видеоизображениях, записанных в течение 30 минут [38].

Эти исследования предполагают, что веполоксамер сравним по эффективности с высокоспецифичными блокаторами адгезии и проявляет сильную анти-VCAM активность, которая может иметь особое значение для ACS.

Влияние на ломкость эритроцитов

Веполоксамер и его неочищенное исходное соединение (полоксамер 188) хорошо известны своими мембранными герметизирующими и стабилизирующими свойствами в большом количестве клеток в отношении широкого спектра механических и химических проблем [12,15,26]. Бэк продемонстрировал повышенную выживаемость культивируемых эритроцитов в присутствии полоксамера 188, что позволяет предположить, что он снижает вызванное гидродинамическим стрессом повреждение мембраны в условиях культивирования [41]. Недавно Хайнс и его коллеги исследовали влияние веполоксамера на гемолиз sRBC, вызванный сдвигом.При воздействии физиологически релевантной скорости сдвига веполоксамер в терапевтически релевантных концентрациях демонстрировал умеренное, но статистически значимое снижение гемолиза (фиг. 8).

Фигура 8: Веполоксамер снижает гемолиз серповидно-клеточных эритроцитов.

Влияние веполоксамера на гемолиз эритроцитов SS, полученных от пациентов с серповидно-клеточными клетками в стационарном состоянии (n = 10). Свежеотобранную цельную кровь хранили на льду в течение 2 часов и инкубировали с веполоксамером (1 мг / мл) или физиологическим раствором в течение 30 минут при 37 ° C. Образцы разбавляли до концентрации гемоглобина 0,9 г / дл и вызывали механическое «турбулентное» напряжение в течение 3 минут 10 минут. Свободный гемоглобин измеряли как показатель гемолиза [35].

В соответствии с этими наблюдениями, снижение ЛДГ наблюдалось у пациентов, получавших неочищенный полоксамер 188, по сравнению с плацебо в рандомизированном исследовании фазы 2 у пациентов с SCD в ЛОС [42]. В совокупности эти исследования предоставляют убедительные доказательства того, что веполоксамер повышает устойчивость здоровых эритроцитов и sRBC к гемолизу.Однако необходимы дополнительные исследования, чтобы изучить потенциал веполоксамера для снижения гемолиза во время ОКС, а также потенциальные клинические преимущества, которые могут возникнуть в результате этого действия.

Влияние на дисфункциональную коагуляцию / тромбоз

В фармакологически активных концентрациях веполоксамер не проявляет антикоагулянтной активности и не изменяет функцию тромбоцитов при исследовании в стандартных анализах коагуляции и агрегации тромбоцитов [26]. Однако он ингибирует вызванную сдвигом агрегацию тромбоцитов цельной крови [45] и подавляет прокоагулянтное действие циркулирующих микрочастиц у пациентов с серповидно-клеточной анемией [46].Эти последние наблюдения согласуются с сообщениями, описывающими сильную антитромботическую активность после лечения [47], и в совокупности предполагают, что веполоксамер может смягчать дисфункциональную коагуляцию и тромбоз, возникающие при ОКС.

Веполоксамер исследовали на модели ACS у трансгенных мышей человека (т.е. HbS Tg). Мышей, экспрессирующих HbS человека на уровне 60% или 100%, лечили однократной внутривенной дозой веполоксамера 400 мг / кг (n = 20) или аналогичным объемом физиологического раствора (контроль) (n = 20) и подвергали гипоксии (5 % O2).После гипоксии количество серповидных эритроцитов в периферической крови со временем увеличивалось, а затем резко снижалось до появления симптомов ОКС. Четырнадцать из двадцати контрольных (60 и 100% HbS) мышей Tg умерли в течение 60 минут. В отличие от этого, пятнадцать из двадцати мышей Tg, обработанных веполоксамером (60 и 100% HbS), выжили в течение 60 минут (т.е. в течение всего эксперимента).

Патология легких была оценена у 13 контрольных и 13 мышей HbS Tg, получавших веполоксамер, и результаты суммированы в таблице 1.Тромбоз был обнаружен у всех 13 контрольных мышей и считался тяжелым у 10 из 13 животных, а у трех других — нетяжелым. Тромбоз наблюдался только у 2 из 13 мышей, получавших веполоксамер, и в обоих случаях он считался нетяжелым. У девяти из 13 контрольных мышей наблюдалась инфильтрация эритроцитов и частичное повреждение промежуточной стенки перегородки, в то время как ни у одной из мышей, получавших веполоксамер, таких изменений не было. Утечка эритроцитов в альвеолярное пространство была обнаружена у 8 из 13 контрольных мышей, в то время как она не присутствовала ни у одной из мышей, получавших веполоксамер.Одиннадцать контрольных мышей показали застой в легких, в то время как ни у одного из животных, получавших веполоксамер, не было обнаружено ни одного. Все изменения, вызванные веполоксамером, были очень значительными (см. Таблицу 1).

Патология	Контроль	Обработанный веполоксамером	Значение *
Тромбоз	13/13	13 февраля	<0. 0001
Инфильтрация эритроцитов	13 сентября	0/13	0,0002
Повреждена промежуточная стенка перегородки	13 сентября	0/13	0,0002
Эритроциты в альвеолярном пространстве	13 августа	0/13	0,0008
Перегрузка	13 ноября	0/13	<0.0001

Таблица 1: Влияние веполоксамера на патологию легких при экспериментальном ОКС.

* двустороннее p-значение с использованием точного критерия Фишера

Результаты демонстрируют, что веполоксамер снижает смертность и предотвращает развитие ACS-подобной легочной патологии на соответствующей модели острого серповидно-индуцированного ACS.

Безопасность веполоксамера изучалась в рамках открытого исследования повышения дозы у 43 пациентов с SCD с диагнозом ACS [48].Для постановки диагноза ОКС необходимо, чтобы у субъекта была подтвержденная ВСС, внезапное начало острой боли в груди или респираторного дистресса продолжительностью не менее 4 часов, а также новый клинически значимый инфильтрат на рентгеновском снимке грудной клетки. Подходящие субъекты получали общие дозы веполоксамера от 1120 до 2960 мг, вводимых в течение 24-часового окна путем непрерывной внутривенной инфузии. Были изучены пять уровней доз минимум с шестью пациентами на каждом уровне дозы. Безопасность оценивалась по клиническим исходам и клиническим лабораторным показателям, включая специальные тесты почечной функции.

Веполоксамер в целом хорошо переносился при всех уровнях доз. Особое внимание в исследовании уделялось функции почек, поскольку в более ранних исследованиях, посвященных изучению неочищенного полоксамера у пациентов с инфарктом миокарда, наблюдалась почечная дисфункция. В отличие от этих более ранних исследований, не наблюдалось клинически значимого дозозависимого увеличения креатинина сыворотки. Кроме того, не было дозозависимых или клинически значимых изменений специализированных биомаркеров почечной функции (т.е. целостность клубочков, проницаемость и фильтрация; травма проксимальных канальцев; дистальный канальцевый транспорт и всасывание белка). Как сообщалось в предыдущих исследованиях веполоксамера у пациентов с серповидноклеточными клетками, [49,50] функциональные тесты печени, особенно билирубин и сывороточные трансаминазы, были от слабого до умеренного повышения во время инфузии веполоксамера, но нормализовались до исходного уровня во время последующего наблюдения (обычно через день 5-10, но не позднее 28-35 дня после инфузии). Авторы пришли к выводу, что назначение веполоксамера пациентам с ОКС безопасно.

Хотя исследование не было разработано для оценки эффективности, наблюдались тенденции в биомаркерах и клинических исходах, указывающих на пользу. Сообщается, что степень sPLA2 коррелирует с показателями клинической тяжести ACS, а повышение концентрации sPLA2 совпадает с началом ACS [51]. Для всех доз все пациенты с повышенным sPLA2 показали значительное снижение к концу инфузии веполоксамера, которое также продолжало снижаться в течение оставшейся части исследования. И взрослые, и педиатрические пациенты показали сходные тенденции в концентрациях sPLA2 [52].Кроме того, наблюдались тенденции, особенно при более высоких дозах и у детей, к более короткой продолжительности эпизода ОКС и продолжительности госпитализации, особенно по сравнению с историческими контрольными группами.

Острый грудной синдром — одно из наиболее частых осложнений при ВСС и вместе с легочной гипертензией является наиболее частой причиной смерти. Несмотря на его клиническое воздействие, альтернативы лечения ОКС ограничены, и существует неудовлетворенная потребность в новых профилактических или терапевтических вмешательствах.В этом документе мы приводим обоснование использования веполоксамера при ACS. Наш самый убедительный аргумент основан на двух основных и взаимодополняющих соображениях: во-первых, поскольку в основе ACS лежат множественные патофизиологические процессы, для достижения оптимальных результатов может потребоваться рассмотреть несколько процессов. Веполоксамер может однозначно добиться этого. Во-вторых, веполоксамер кажется безопасным и хорошо переносимым пациентами с ОКС при воздействиях, равных или превышающих те, которые приводят к желаемой фармакологической активности.Эти и другие соображения более подробно обсуждаются ниже.

В этом документе мы представляем данные, показывающие, что веполоксамер обладает способностью улучшать многие из биологических процессов, которые, по-видимому, составляют патофизиологию ACS. Мы представили данные, показывающие, что он улучшает деформируемость и фильтруемость sRBC, тем самым улучшая их способность двигаться через узкие каналы, аналогичные тем, с которыми эти клетки сталкиваются in vivo в микроциркуляторном русле SCD. Мы также обсудили влияние веполоксамера на снижение вязкости цельной крови при низких скоростях сдвига.Другие опубликованные отчеты подтверждают эту активность [26,53]. Преимущества этой реологической активности в отношении кровотока были продемонстрированы in vivo во время клинических испытаний ЛОС. Введение веполоксамера пациентам с SCD во время VOC значительно улучшило скорость эритроцитов на 2 часа после начала инфузии у всех субъектов, получавших веполоксамер, но ни у одного из контрольных. Дополнительное улучшение также наблюдалось через 7 часов после инфузии, так что скорость эритроцитов вернулась к значениям, аналогичным тем, которые наблюдались в стабильном состоянии у всех субъектов, получавших веполоксамер, но ни у одного из контролей [54].Как упоминалось ранее, легочная вазоокклюзия и снижение кровотока признаны частым патофизиологическим событием, инициирующим клинические проявления ОКС. Ведется ли это в первую очередь за счет повышенной клеточной адгезии [55] или за счет повышенной агрегации эритроцитов — вопрос спорный [56]. В этой публикации представлены данные о том, что веполоксамер уменьшает обе эти основные патологии.

Мы также обсудили роль гемолиза при ОКС и представили результаты, показывающие, что веполоксамер стабилизирует мембраны эритроцитов от гемолиза. Эти данные согласуются с обширной литературой, показывающей, что веполоксамер и его неочищенный родительский полоксамер 188 защищают мембраны широкого спектра клеток от механических и химических повреждений [12, 26]. Это предполагает, что веполоксамер может не только защищать поврежденные sRBC от гемолиза, но также защищать эндотелий и другие ткани от ишемического и реперфузионного повреждения, как предполагает Хантер [26].

Способность защищать клетки от механической травмы также может вносить вклад в сообщаемую антитромботическую активность веполоксамера.Стабилизируя эритроциты от повреждения мембраны, вызванного сдвигом, веполоксамер может предотвращать утечку АДФ и, таким образом, индуцированную АДФ агрегацию / тромбоз тромбоцитов. Этот механизм может также учитывать сообщаемую активность по противодействию прокоагулянтному действию микрочастиц.

Некоторые из наиболее убедительных доказательств потенциальной пользы веполоксамера для лечения ОКС получены в исследованиях, проведенных на трансгенных животных с HbS человека. Особый интерес вызвали результаты патологии, демонстрирующие заметное уменьшение клеточной инфильтрации и тромбоза при лечении веполоксамером.Эти эффекты согласуются с антитромботическим действием веполоксамера в других экспериментальных моделях. Роль тромбоза при ОКС остается предметом предположений. Однако тромбоз легочных сосудов — частая находка при вскрытии пациентов с ВСС, а тромбоз легочной артерии наблюдался с распространенностью 17% в недавнем анализе пациентов с ОКС [57]. Эти данные позволяют предположить, что антитромботическая терапия таким агентом, как веполоксамер, может быть важной терапевтической целью при ОКС.

Наш документ завершается обсуждением фазы I исследования безопасности, проведенного с веполоксамером у серповидно-клеточных пациентов с ОКС [48].В исследовании изучались уровни воздействия в диапазоне концентраций, демонстрирующих фармакологическую активность, обсуждаемую в этой публикации. На всех уровнях воздействия препарата веполоксамер хорошо переносился и казался безопасным. Хотя исследование не предназначалось для оценки эффективности, наблюдались тенденции к уменьшению количества госпитализаций и биомаркеров sPLA2. Безопасность, наблюдаемая в этом исследовании, дополнительно подтверждается обширной группой доклинических токсикологических исследований веполоксамера.Включены исследования, в которых веполоксамер вводили крысам и собакам в течение 28 дней подряд в виде непрерывной внутривенной инфузии. В этих исследованиях уровень отсутствия наблюдаемых побочных эффектов (NOAEL) для общего воздействия составлял 20160 мг / кг у собак и 10 080 мг / кг у крыс. Учитывая, что ожидаемое общее острое воздействие велопоксамера для лечения ОКС находится в диапазоне 1500-2500 мг / кг, мы прогнозируем коэффициент безопасности в несколько раз в отношении воздействия.

Ожидается, что результаты исследования фазы III EPIC с веполоксамером послужат дополнительным обоснованием для оценки его использования при лечении ОКС.

При ОКС (и других вазоокклюзионных событиях, связанных с серпом) наблюдаются множественные патологические процессы, включая дисфункциональную коагуляцию, воспаление, несоответствующую клеточную адгезию, гемолиз и другие, которые способствуют ишемии и повреждению тканей. Общим знаменателем этих, казалось бы, несопоставимых путей может быть воздействие обычно скрытых гидрофобных фосфолипидов в поврежденных клеточных мембранах, служащих поверхностями активации для вышеупомянутых патологических каскадов. Агент, такой как веполоксамер, который будет связываться с такими поверхностями, мгновенно герметизируя поврежденную мембрану и восстанавливая нормальные характеристики гидратации поверхности, может, таким образом, ингибировать множественные патологические пути посредством единственной механической активности.Отсутствие таких поврежденных поверхностей в здоровых тканях может также объяснять профиль безопасности веполоксамеров и наблюдения, что фармакологически активные концентрации веполоксамера кажутся безопасными и хорошо переносимыми у пациентов с SCD с ACS.

alexxlab